卵巢癌耐藥細胞的建立就是體外低濃度培養細胞,逐漸誘導耐藥。可是整個過程耗時長,易受污染,成功率一般。后來了解到還可以通過裸鼠荷瘤的方式,給裸鼠腹腔注射藥物逐漸誘導耐藥,取瘤組織研碎制成細胞懸液在再培養幾代可得腫瘤細胞。這樣時間就縮短了很多~而且不受污染等條件限制。卵巢癌耐藥細胞的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細胞本身生物化學過程的改變,細胞膜上出現Pgp(或P-170)糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受。
卵巢癌耐藥細胞通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為耐藥細胞,卵巢癌耐藥細胞是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。卵巢癌耐藥細胞的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經傳代成功后即為細胞系,由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代次數有限,可稱為有限細胞系,如可以連續培養,則稱為連續細胞系,培養50代以上并無限培養下去。所以卵巢癌耐藥細胞是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。從培養代數來講,可培養到40-50代。如果不能繼續傳代或傳代數有限,稱為有限細胞株;如果可以連續傳代,稱為連續細胞株。對于人類腫瘤細胞,在體外培養半年以上,生長穩定,并連續傳代的即可稱為連續性株或系。
卵巢癌耐藥細胞注意事項:
1、觀察細胞好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。
4、收到細胞后,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。